Продолжаем разговор о питательных средах

По составу питательные среды бывают:

- натуральные состоят из продуктов животного или растительного происхождения, имеют неопределённый химический состав. Такие среды, в основном, используются для поддержания культур и их накопления, так как из-за неопределенного химического состава они мало пригодны для изучения физиологии микроорганизмов (мясо-пептонный агар, мясо-пептонный бульон, картофельный агар и др.);

- полусинтетические в состав которых входят продукты неопределённого состава – пептоны, мясные перевары, дрожжевой экстракт, и известные химические соединения – хлорид натрия, сульфаты, углеводы, индикаторы и др. (элективная солевая среда, среда Сабуро, агар Шедлера, Колумбийский агар с бараньей кровью и теллуритом);

- синтетические состав полностью определён в отношении химических веществ и их точных концентраций. Такие среды более других удобны для исследования обмена веществ микроорганизмов, однако лишь для немногих из них разработаны синтетические среды. (среда Симмонса, принцип которого основан на способности микроорганизмов использовать цитрат в качестве источника энергии, создана для дифференциации грамотрицательных бактерий).

- По назначению питательные среды бывают:

- Универсальные - используются для выращивания большого количества микроорганизмов, не обладающих сложными питательными потребностями, а так же применимы в качестве основы для приготовления сред с более сложным составом (мясо-пептонный агар, трипказо-соевый агар, бульон Хоттингера, сусло – агар);

- Специальные - среды предназначены для избирательного культивирования и изучения определенных видов микроорганизмов, которые подразделяются на следующие виды:

- Селективные - обеспечивают преимущественное развитие определенных видов микроорганизмов. Избирательность среды достигается путем добавления различных компонентов, таких как антибиотики или различные химические вещества, регулирование уровня pH, которые ограничивают рост и размножение нежелательных организмов и способствуют росту и развитию исследуемых.

Примеры селективных питательных сред - колумбийский агар с НДК и бараньей кровью, XLD агар, агар цетримидный, ареда Сабуро, агар МакКонки.

- Дифференциально-диагностические - применяют для изучения биохимических свойств и дифференцирования микроорганизмов разных групп по характеру их ферментативной активности по отношению к определенным типам субстрата (углеводы, аминокислоты и др.), индикаторам.

Например, среда Эндо позволяет отличить микроорганизмы, ферментирующие лактозу до ацетальдегида от тех, кто не обладает этим свойством. Состав среды включает питательную основу, агар, лактозу и цветной индикатор – основной фуксин. Исходная питательная среда имеет розовый цвет. Микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, образуют на среде бесцветные или розовые колонии в тон среды. При ферментации лактозы до ацетальдегида последний реагирует с сульфитом, в результате чего колонии окрашиваются в малиновый или красный цвет с металлическим блеском.

Другие примеры дифференциально-диагностических сред – агар МакКонки, среда СШ (Плоскирева), хромогенный агар для обнаружения и подсчета уропатогенных бактерий.

- Транспортные - используют для сохранения жизнеспособности микроорганизмов от момента взятия материала до его посева. Состав такой среды должен позволить предотвратить избыточное размножение сопутствующей микрофлоры во время транспортировки и хранения.

Примеры транспортных сред – среда Эймса, среда Кери- Блэйр.

Наиболее важным является то, что микроорганизмы имеют разные требования к условиям среды, включая доступ кислорода, в связи с чем и подразделяются на аэробных и анаэробных. При этом строго облигатными анаэробами считаются бактерии, рост которых невозможен в присутствии кислорода. Питательные среды для их культивирования, содержат большое количество источников белкового питания. Часто требуются стимуляторы роста бактерий, которые вводят в состав питательных среда так же селекционирующие вещества, поскольку менее требовательные микроорганизмы препятствуют росту анаэробов.

Степень анаэробиоза измеряется по окислительно-восстановительному потенциалу (Eh) среды - при увеличении присутствия растворенного кислорода подавляется рост всех анаэробных бактерий. Для удаления кислорода и создания соответствующих условий культивирования необходимо применение соответствующей строгой анаэробной техники (анаэростат, газогенерирующие пакеты и др.).

Примеры питательных сред для облигатных анаэробов – Агар Шедлера с бараньей кровью, агар Шедлера, тиогликолевая среда.

Что касается культивирования микроорганизмов, способных хорошо расти в присутствии кислорода (аэробных), то для их изучения в практике используется большое количество разнообразных по составу и по назначению сред, например, Колумбийский агар с НДК и бараньей кровью, агар CLED, шоколадный агар с факторами роста, цетримидный агар.